展青霉素又稱展青霉毒素、棒曲霉素、珊瑚青霉毒素，它是一由曲霉和青霉等真菌產(chǎn)生的一種次級(jí)代謝產(chǎn)物，棒曲霉素具有廣譜的抗生素特點(diǎn)。展青霉素是一種世界范圍內(nèi)的水果污染物，在多種水果、水果制品和果酒中均有發(fā)現(xiàn)，對(duì)人及動(dòng)物具有較強(qiáng)的毒性作用。當(dāng)人攝取了展青霉素，可通過影響細(xì)胞膜的透過性間接地引起生理呼吸異常。鑒于展青霉素的毒性及其污染情況，開展展青霉素的檢測(cè)非常必要。

中檢維康研發(fā)的Clover- SepMyco 228多功能固相凈化柱，展青霉素固相凈化柱，該方法符合GB 5009.185-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中展青霉素的測(cè)定，操作簡(jiǎn)便快捷，與國(guó)內(nèi)外的其他產(chǎn)品相比，具有回收率高，凈化效果好等優(yōu)點(diǎn)。

操作方法如下：

Clover- SepMyco 228多功能固相凈化柱

高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)展青霉素

參考標(biāo)準(zhǔn)

2  GB 5009.185-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中展青霉素的測(cè)定

試劑配制

2  乙酸溶液:取10mL乙酸加入250mL水,混勻。

2  果膠酶(液體):活性 ≥1500U / g , 2℃~8℃ 避光保存。(P/N: Clover 228-01)

樣品提取

2  液體試樣(蘋果汁、山楂汁等)

稱取4g試樣(準(zhǔn)確至0.01g)于50mL離心管中,加入21mL乙腈,混合均勻,在6000r/min下離心5min,待凈化。

2  固體、半流體試樣(山楂片、果丹皮、蘋果果泥、蘋果果醬、帶果粒果汁等)

稱取1g試樣(準(zhǔn)確至0.01g)于50mL離心管中,再加入10mL水與150μL果膠酶溶液混勻,室溫下避光放置過夜后,加入10.0mL乙酸乙酯,渦旋 混合5min,在6000r/min下離心5min,移取乙酸乙酯層至梨形燒瓶。再用10.0mL乙酸乙酯提取一次,合并兩次乙酸乙酯提取液,在40℃水浴中用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至干,以2.0mL乙酸溶液溶解殘留物, 再加入8mL乙腈,混勻后待凈化。

樣品凈化

將提取液通過凈化柱凈化,棄去初始的1mL凈化液,收集后續(xù)部分。用吸量管準(zhǔn)確吸取5.0mL凈化液,加入20μL乙酸,在40℃下用氮?dú)饩従彽卮抵两?/span>,加入乙酸溶液定容至1mL,渦旋30s溶解殘?jiān)?/span>,過0.22μm 濾膜,收集濾液于進(jìn)樣瓶中以備進(jìn)樣。

液相色譜條件

2  色譜柱：Cloversil-C18 4.6*150mm（5um）或4.6*250mm（5um）

2  流動(dòng)相：乙腈-水（5+95，v/v）或甲醇-水（10+90，v/v）

2  流速：0.8mL/min

2  檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器，波長(zhǎng)276nm

2  進(jìn)樣體積：20~100uL

2  柱溫：40℃

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